جداسازی و شناسایی باکتری های متانوتروف از برخی مناطق نفت خیز خوزستان

مخازن نفتی منابع زیرزمینی از آلکان های با زنجیره کوتاه و بلند (c1-c30)، خطی، زنجیره ای و شاخه دار هستند. گاز طبیعی در اثر فشار مخزن به صورت عمودی به سمت بالای سطح زمین نفوذ می کند و بخشی از آن توسط میکروارگانیسم های اکسیدکننده هیدروکربن مصرف می شوند. این میکروارگانیسم ها می توانند از آلکان های کوتاه زنجیره (c1-c4)، به عنوان منبع کربن و انرژی استفاده کنند. از آن جایی که اکتشاف ژئومیکربی هیدروکربن ها یک روش اکتشافی بر اساس نفوذ هیدروکربن های سبک از جمله گاز متان از منابع نفت و گاز به سمت سطح زمین و استفاده از آن ها توسط باکتری های مصرف کننده متان می باشد می توان از این باکتری ها به عنوان اندیکاتورهای میکربی به منظور اکتشاف نفت و گاز استفاده کرد. هدف از تحقیق حاضر، جداسازی و شناسایی باکتری های مصرف کننده متان به عنوان تنها منبع کربن و انرژِی بود. برای این منظور نمونه هایی از مناطق نفتی، مشکوک به نفت و غیر نفتی جمع آوری شد. سوسپانسیون باکتریایی تهیه و به محیط اختصاصی nms براث تلقیح شد سپس ارلن ها در سامانه جارهای حاوی اتمسفر 50 درصد هوا و 50 درصد متان (با خلوص 99/99 درصد)، قرار گرفتند. مخلوط گازی هر دو روز تجدید می شد. سپس نمونه های کشت مایع روی پلیت های nms آگار توزیع شد. پلیت ها به مدت دو هفته در جارهای با ترکیب گازی ذکر شده قرار گرفتند. کلنی های تک به پلیت های nms آگار تازه منتقل و به مدت چند هفته گرماگذاری می شد. منحنی رشد جدایه ها در مقادیر مختلف دما و ph رسم شد. این جدایه ها با استفاده از تست های بیوشیمیایی و تعیین سکانس ژن 16s rrna تعیین هویت شدند. در نتیجه این تحقیق، سه جدایه متعلق به sphingomonas sanguinis، sphingomonas parapaucimobilis و achromobacter xylosoxidans. از مناطق نفتی و مشکوک به وجود نفت جداشدند. شرایط بهینه برای رشد توسط هر سه جدایه عبارت بودند از: دمای 30 درجه سانتی گراد و 4/7 ph . براساس نتایج بدست آمده می توان بیان کرد که باکتری های جداسازی شده توانایی مصرف متان را دارند و می توان از آن ها به عنوان اندیکاتورهای میکربی در اکتشاف نفت استفاده کرد.